Вагинальная цитология проводится с целью определения стадии эстрального цикла, определения сроков вязки и родов, для определения отклонений в эстральном цикле, определения природы выделений из вульвы. К, сожалению, с помощью этого метода невозможно определить сроки овуляции.
Техника проведения.
Ватный тампон, пропитанный физиологическим раствором, вводится во влагалище. Необходимо избегать касания клитора, ямки клитора и кожи, так как в этих областях содержатся клетки, которые могут помешать интерпретировать результаты. Далее тампон аккуратно прокатывают по предметному стеклу, делая несколько продольных мазков.
Для окраски препаратов можно пользоваться различными красителями. Мы используем для окраски препаратов краситель Дифф- Квик, так же можно пользоваться метиленовым синим и др. красителями.
Перед тем как начать окраску препарата, лучше его высушить. Капля красителя помещается на область нахождения клеток и накрывается покровным стеклом.
Какие клетки мы можем увидеть?
Парабазальные клетки - имеют округлую или слегка овальную форму, небольшое количество цитоплазмы и большое ядро.
Промежуточные клетки - гладкие, округлые или овальные, имеют неровные очертания и содержащее везикулы ядро, которое меньше, чем ядро парабазальных клеток. Размер этих клеток весьма разнообразен. Они могут быть немного крупнее парабазальных, а могут превышать по величине парабазальные клетки в 2 раза.
Поверхностные клетки - это мертвые клеточные элементы, которые выстилают влагалище сук во время эструса. Это самые крупные из обнаруживаемых во влагалищных мазках клетки. Они имеют заостренную форму, угловатые контуры цитоплазмы и мелкие, сморщенные, частично лизированные ядра или вообще не содержат ядер.
Поверхностные промежуточные клетки - имеют относительно нормальное ядро, но в целом по внешнему виду являются типичными поверхностными клетками.
Безъядерные клетки - чешуйки - крупные, мертвые, неправильной формы клетки, не содержащие ядер. Они представляют собой конечную фазу отмирания, которая начинается уже в парабазальных клетках. Так же часто эти клетки называют "полностью ороговевшими" или "полностью кератинизированными клетками".
Метэстральные клетки - обычно крупнее промежуточных клеток. В их цитоплазме часто находят один или большее количество нейтрофилов. Метэстральные клетки, как правило, обнаруживаются в начале диэструса или в случаях вагинита. Очень редко такие клетки встречаются в начале проэструса.
| Клетки/ Стадия цикла | Проэструс | Эструс | Диэструс |
| Парабазальные клетки | + | - | + |
| Промежуточные клетки | + | редко | + |
| Поверхностно промежуточные клетки | +/- появляются ближе к концу |
+ | +/- |
| Поверхностные клетки | редко, чаще появляются в конце | более 80-90 % | редко |
| Эритроциты | + | +/- | +/- |
| Лейкоциты | + | - | ++/+ |
Во время проэструса
парабазальные, промежуточные и некоторые поверхностные клетки отторгаются.
Обнаруживаются эритроциты, лейкоциты и бактерии.
При приближении эструса
отмечается значительное повышение эпителиальных клеток и снижение содержания лейкоцитов. Во время эструса преобладают поверхностные клетки (иногда они составляют более 90% отторгающихся эпителиальных клеток).
Могут обнаруживаться эритроциты и внеклеточные бактерии. Лейкоциты в период эструса отсутствуют, за исключением случаев, когда имеет место сопутствующий воспалительный процесс.
Диэструс
сопровождается наличием резких изменений: парабазальные и промежуточные клетки превышают по количеству поверхностные клетки. Слои поверхностных клеток могут отмечаться в начале диэструса. Практически всегда снова появляются лейкоциты. Часто обнаруживаются эритроциты и бактерии.
Такие же изменения происходят во время эстрального цикла у кошек
, но у них редко обнаруживают эритроциты и лейкоциты.
 .
|
 .
|
| Проэструс. Видно большое количество эритроцитов (маленькие красные точки) (х 10). | Проэструс. Большое кол-во нейтрофилов, эритроцитов, появляются поверхностные клетки. (х 40). |
 .
|
 .
|
| Эструс. Более 80% поверхностных клеток (х 10). | Эструс (х 40). |
 .
|
 .
|
| Диэструс. Поверхностные клетки составляют менее 20% (х 10). | Диэструс (х 40). |
 .
|
|
| Диэструс. Стрелкой указана метэстральная клетка (х 100). |
Подготовка собак к вязке.
1. Для вязки подбирайте только здоровых животных.
2. Определите первый день эструса. Начинайте в ранний период течки (на третий день проэструса). Наблюдайте каждый день за поведением суки (провоцируйте ее самцом) и /или проводите регулярное вагинальное цитологическое исследование. (Для более точного определения времени овуляции и дат вязки можно определять содержание прогестерона в сыворотке , приблизительно за 24-48 часов до предовуляционного выброса ЛГ концентрация прогестерона поднимается выше 1,0 нг/мл в типичных случаях спустя 2 дня (во время овуляции) концентрация прогестерона составляет 4-10 нг/мл)
3. Когда поверхностные клетки в мазках достигнут 80% от всего количества эпителиальных клеток, необходимо поместить суку с кобелем.
4. Вязку следует повторять до тех пор, пока сука не начнет отказываться от вязки (не всегда можно определить) и цитологическая картина будет соответствовать эструсу. Интервалы между вязками в среднем 3-4 дня, однако для каждого конкретного случая нужно подбирать свой режим вязок.
5. Обследование на беременность проводится через 21-30 дней. При отсутствии беременности определить содержание прогестерона в сыворотке для оценки овуляции и лютеиновой функции.
Для статьи были использованы материалы:
Лабораторная диагностика в клинике мелких домашних животных. М. Уиллард, Г. Тведтен, Г. Торнвальд
Эндокринология и репродукция собак и кошек. Э. Фелдмен, Р. Нелсон.
Каждому заводчику в разведении важно уметь точно определять наилучшие дни для вязки. Хочу поделиться собственным опытом определения плодных дней у суки (левретка) во время течки. Вязка планировалась очень важная, "холостить" мы просто не имели права, поэтому готовились очень тщательно. Это у нас уже вторая вязка, первый раз данная сука родила 5 щенков. Я прочитал много литературы на тему: определение плодных дней у собак.
Решено было определять овуляцию и полное созревание яйцеклеток для оплодотворения, по следующим критериям:
1) Внешние визуальные признаки (состояние петли, характер выделений из влагалища, поведение суки).
2) Проходимость влагалища (во время овуляции палец легко проходит внутрь).
3) Кристаллизация слюны (метод "Арбор").
4) Позеленение тест-полоски, определяющей уровень глюкозы в выделениях суки.
5) Характер изменения эпителиальных клеток во влагалище суки (цитологическое иследование вагинальных мазков).
6) Количество прогестерона в крови суки.
Останавливаюсь детально на каждом: Петля во время течки увеличивается в размерах, когда петля достигает максимальных размеров - она очень становится отечной (твердой), вязать суку еще рано, когда петля слегка начнет уменьшаться - "сдуваться", отечность пропадает - петля становиться мягкой, слегка сморщенной, как запеченное яблоко. Вход во влагалище смотрит не вниз, как в начале течки, а разворачивается наружу. Можно легко наблюдать промежность. Подробно фото отчет:
Именно в этот период выделение, как правило светлеют до светло-красного или розового цвета, могут становиться полностью прозрачными. Иногда выделения не светлеют и на протяжении всей течки остаются красными, хотя овуляция успешно происходит. Также следует отметить, что во время плодных дней, выделения становятся скользкими на осчуп, имеют характерный резкий "рыбный" запах. Их количество может немного уменьшиться в сравнении с начальными днями. Сука начинает отводить хвост во время овуляции или за пару дней до нее, некоторые суки начинают отводить хвост с начала течки. Но именно во время плодных дней сука, помимо того, что отводит хвост, становится в стойку, при нажатии на круп или при прикосновении в области петли, петля начинает "играть" поднимается в верх. Сука требует, что бы ее вязали, скулит, вяжет других собак, возбужденная в поведении. Во время плодных дней, отечность влагалища спадает, оно становится на осчуп мягким. Что бы проверить проходимость влагалища, необходимо одеть стирильные перчатки, указательный палец обработать интимной смазкой и без усилий засунуть во влагалище суки. Если палец не проходит - вязать еще рано, во время плодных палец проходит легко. Данную манипуляцию необходимо проводить очень осторожно, что бы не травмировать суку.
Метод "Арбор" , показывает повышение глюкозы в слюне собаки. Пока я выложу, фотографии сделанные в данную течку. Далее я хочу подобно остановиться на данном вопросе. Течка началась 13.01.13, на фотографиях стоит дата.
К сожалению, фотографии тест-полосок есть не за все дни, но по наблюдениям могу сказать, что максимально позеленела полоска 26.01.13. В этот же день, как можно видеть на фотографиях, "арбор" показал максимальную кристаллизацию слюны.
Здесь необходимо вспомнить таблицу значений прогестерона, и способности оплодотворяться яйцеклетки.
делаем повторный анализ через 4 дня
3-4 ng/ml повторяем анализ через 1-2 дня
5-7 ng/ml (15-25 nmol) овуляции произошла, осеменяем на второй день и в следующие три дня
8-11 ng/ml (25-35 nmol) осеменяем сегодня и через день
11-19 ng/ml (35-60 nmol) осеменяем сегодня и в течение 24 часов
> 19 ng/ml (>60 nmol) осеменяем сегодня (сейчас!)
Хочу заметить, это самый надежный на нынешнее время метод определения лучших дней для вязки. В нашем случае 24.01.13 (12 день течки) прогестерон был 21,8 nmol
Несколько гормонов отвечают за регулирование цикла и последующую беременность.
Эстроген: участвует в формировании яйцеклетки;
Лютеинизирующий гормон (ЛГ): стимулирует производство яичниками яйцеклетки
Прогестерон: отвечает за формирование беременности.
А Созревание фолликула
В Изменение уровня гормонов:
1 - Фолликулостимулирующий гормон
2 - Эстрогены
3 - Лютеинизирующий гормон
4 - Прогестерон
1 Течка
2 Созревающий фолликул
3 Граафов фолликул
4 Овуляция
5 Жёлтое тело
6 Жёлтое тело прекращает функционировать
Время овуляции зависит от начала проэструса. Ооциты у сук овулируются в незрелом состоянии и не могут быть оплодотворены немедленно. Оплодотворение может произойти только вслед за созреванием первичных ооцитов, изгнания полярного тела и завершения первого мейотического деления - процессы протекают в среднем 48 часов после овуляции. Овуляция же происходит через два дня после всплеска уровня гормона ЛГ - лютеинизирующего гормона в плазме крови. Ооциты остаются жизнеспособными в репродуктивном тракте ещё 4-5 дней, поэтому переод оплодотворения сук затягивается до4-7 дней после преовуляционного всплеска уровня ЛГ, т.е. 2-5 дней после овуляции. Фертильный период растягивается от 3 до 7 дней после преовуляционного повышения уровня ЛГ и может быть длиннее у собак с превосходным качеством спермы. Оптимальное время для спаривания может быть оценино измерением всплеска уровня ЛГ Начало эструза совпадает по времени со всплеском уровня ЛГ, что у меня произошла 27 марта, кровянистые выделение первые были замечаны 20 марта (в предыдущую течку всплеск ЛГ был отмечен на 14 день от начала проэструса). Спаривание через 4 дня от начала появления эструса более подходящее время. различимое размягчение вульвы так же возникает со всплеском ЛГ, когда наблюдается колебание от высокого уровня до низкого уравня эстрогенов с подъемом уровня прогестерона. По содержанию прогестерона в плазме крови определяют, какая из возможностей реализовалась. Концентрация 9 ммоль/л (3 нг/мл) указывает на овуляторный пик ЛГ (показатель для всех пород ЛГ 4-6 нг/мл) , показатели 30 ммоль/л (10 нг/мл) свидетельствуют о состоявшейся овуляции.Теперь опишу ход течки.
23.01.13 (11 день течки). Сука хвост отводит, петля начинает играть, достигает максимальных размеров, отечная. Проходимость влагалища еще недостаточно хорошая. Выделения красные. Утром с кобелем заигрывала, но огрызалась. Вечером подпустила кобеля. Уриглюк слегка позеленел, кристаллизация слюны в этот день имела странный "сплошной" характер, поле было занято все без просвета, рисунок очень мелкий. Вагинальный мазок к вечеру очистился, но клетки еще не склеиваются.24.01.13 (12 день течки). Сдали анализ на прогестерон. Прогестерон = 21,8 nmol Петля немного уменьшается, пропадает отечность. При прикосновении петля поднимается вверх, сука становится в стойку. Проходимость влагалища хорошая. Выделения из петли слегка посветлели. Кобеля подпустила охотно. Вечером вязала всех собак, была очень возбужденной, все время скулила. Кристаллизация слюны имеет мелкий сплошной рисунок. Вагинальные мазки чистые, именно в этот день они не покрасились, хотя метилен синий держался, как обычно. Клетки начали слипаться (в мазке имеются только одни эстральные чешуйки) . Уриглюк зеленый.25.01.13 (13 день течки). Петля мягкая, как тряпочка. Выделения посветлевшие (светло-красные). Сука по внешним признакам в сильной охоте. Кристаллизация слюны выражена не ярко. Вагинальные мазки чистые, характерно склеивание клеток - они накладываются друг на друга, как черепица (в мазке имеются только одни эстральные чешуйки) . Уриглюк зеленый.26.01.13 (14 день течки). Остановлюсь подробней на этом дне. Петля продолжает уменьшаться. Выделения так же светло-красные, сука еще по поведению в охоте. В вагинальных мазках пропало склеивание клеток, не такой чистый фон, появились округлые клетки с ядрами. Кристаллизация слюны в этот день имела самую яркую картину: большие листья папоротника. Уриглюк тоже в этот день показал самое большое позеленение тест-полоски. То есть получается, в этот день по всей видимости был максимальный уровень прогестерона. Это показывает, что уровень глюкозы прямо пропорционально зависит от уровня прогестерона. Это важно понимать. Я встречал мысль, что позеленение тест-полоски и кристаллизация слюны является предшественником или началом овуляции, но мое мнение, что эти показатели максимально проявляются именно на последних плодных днях, уже после того как произошла овуляция. И если ориентировать на уровень глюкозы по уриглюку или на кристаллизацию слюны - можно пропустить самые плодные дни. Вспомним таблицу прогестерона, когда прогестерон достигает 60 nmol - это последний день, далее шейка матки закрывается и сперматозоиды не достигнут цели.27.01.13 (15 день течки). Петля практически полностью "сдулась", сука уже не отводит хвост, выделения красные и их количество сократилось. Вагинальные мазки показали достаточно чистую картинку, с небольшим склеиванием клеток. Кристаллизация слюны уже не так ярко выражена, тест-полоска менее зеленая.28.01.13 (16 день течки). В этот день кристаллизация слюны показала необычную картинку. Сука успокоилась, много спит. Вагинальные мазки имеют очень грязный фон.Следует заметить, что ветеринар, который делал анализы на прогестерон, спрогнозировал лучшие дни 24.01.13 и 25.01.13, т.е. 12 и 13 день течки.
Тест на определение овуляции по слюне у собак.
Заводчиков всегда интересует вопрос: когда вязать суку? Всем известно, что оптимальные дни для покрытия суки отличаются у собак одной породы. Они могут «сдвигаться» в течение жизни даже у одной и той же собаки. Считается, что с увеличением возраста суки вязать ее надо в более поздние сроки. Обычно, это действительно так, но известно немало случаев, когда, наоборот, охота, а она как правило совпадает с периодом овуляции, может наступать ранее, чем это было в предыдущие течки. Кроме того, бывают «экземпляры», у которых охота не совпадает с периодом овуляции – она может наступить позже тех дней, когда больше всего шансов забеременеть.
Опытные заводчики знают, что лучшее время для покрытия – это день до овуляции и первые дни овуляции. В это время выделения светлеют и становятся более слизистыми.
Наличие слизи – необходимое условие для сохранения жизнеспособности сперматозоидов. При отсутствии слизи плодного типа сперматозоиды погибают в кислой среде влагалища. Если собака спит на вашей белой простыне, то можно заметить, что оставленное на месте, где она лежала, пятно, как бы разделено по цвету на две концентрические окружности: внутри круг более темный, снаружи – светлее. В это время петля сильно увеличивается и становится мягкой. Подсчет дней с начала течки, цвет выделений, состояние вульвы и поведение суки – это те признаки, по которым заводчики определяют готовность к вязке. Но это, как бы, вторичные, видимые признаки, обусловленные процессами, происходящими в организме суки во время течки. А именно: яичники начинают вырабатывать фолликулы, содержащие яйцеклетки. Из-за увеличивающегося давления на стенки яичника, большинство фолликул лопаются и зрелые яйцеклетки попадают на воронковидное отверстие яйцепровода – происходит овуляция.
Все эти процессы вызваны гормональными изменениями. С начала течки идет медленный рост гормона эстрагена, достигающий максимума в день овуляции, после чего уровень его быстро спадает в течение одного-двух дней.
Женский стероидный гормон – прогестерон, вырабатываемый в желтом теле яичников, подготавливает матку к имплантации и питании яйца и, если происходит оплодотворение, регулирует обмен веществ в период беременности. Именно по содержанию прогестерона в крови наши западные коллеги определяют оптимальный срок вязки. Его количество должно быть от 6 до 10 единиц. Если меньше 6-ти – вязать рано, если больше 10-ти – уже поздно. Необходимое соотношение гормонов эстрагена и прогестерона можно определить не только по анализу крови, но и по выраженности кристаллизации слюны.
Для определения дня вязки в домашних условиях в настоящее время широко используется метод, открытый еще в 1946 году швейцарским ученым Папаниколау. Этот метод, состоит в том, что анализируя под микроскопом изменение характера кристаллизации высохшей слюны (или шеечной слизи) можно с высокой степенью достоверности судить о наступлении плодного или бесплодного периода и, соответственно, повысить вероятность беременности. По мере увеличения эстрагена в организме увеличивается и количество кристаллов в слюне, причем, в дни овуляции кристаллы приобретают форму, напоминающую папоротник. Этот метод в медицине получил название «арборизация», от латинского arbor – дерево. С появлением изобретенного украинскими учеными тест-микроскопа АРБОР, метод арборизации стал доступен в домашних условиях.
Прибор «Арбор» – это маленький микроскоп в виде трубочки, размером упаковки для губной помады. В специальное отверстие вставляется предметное стеклышко, на котором находится высохшая слюна собаки (в комплекте 32 стекла многократного использования). Направив микроскоп на рассеянный источник света вы наблюдаете ту картину, которая образовалась после высыхания (кристаллизации) слюны.
Для получения достоверных результатов необходимо выполнять следующие правила:
Слюну удобней отбирать в уголке рта – между губой и нижней челюстью. Можно брать пипеткой и потом капнуть ее на предметное стекло, но я беру непосредственно самим стеклом (оно пластиковое и не острое), просовывая его в угол рта. Для лучшего выделения слюны я показываю собаке что-нибудь вкусненькое.
Если на стекле будет много пузырьков, то их нужно убрать, например, наклоняя стекло со слюной в одну сторону и сдвигая пузырьки с поверхности плоской стороной иголки в другую сторону.
Отобранная слюна на стеклышке должна высохнуть естественным образом. Не кладите его на батарею или под лампу, не обдувайте феном. Высыхает она приблизи-тельно за 30-40 минут. Естественно, изначально стекло должно быть сухое и чистое.
Высохшую слюну рассматривают в микроскопе «Арбор». Сравнивая увиденную вами картинку с теми, что приводятся в Инструкции к микроскопу можно определить на какой стадии находится ваша любимая собака. Обычно, я беру сразу несколько контрольных образцов слюны (2-3), т.к. может оказаться, что слюна взята не очень хорошо, например, много пузырьков или слизи.
И еще один совет. В течку, предшествующую той, на которую запланирована вязка вашей собаки, анализируйте слюну с первого до последнего дня течки. Тогда вам станет ясна картина изменения характера кристаллизации слюны и вы сможете сделать прогноз: на какой день наступает пик «цветения папоротников», а значит и тот день, на который, говоря сухим языком собаководов, нужно провести вязку.
Микроскоп Арбор
Естественную половую жизнь, к которой стремится каждая супружеская пара, может обеспечить только естественная регуляция оплодотворения. Открытый еще в1946 году швейцарским ученым Папапиколау метод состоит в том, что анализируя с помощью микроскопа изменение характера кристаллизации слюны в течение менструального цикла, можно с большой достоверностью судить о наступлении плодного и бесплодного периода
Микроскоп Арбор позволяет осуществлять:
Планирование беременности,
Определение благоприятных и неблагоприятных дней для зачатия ребенка,
С высокой степенью вероятности планировать пол будущего ребенка,
Физиологический метод контрацепции,
Контроль процесса гормонального становления в подростковом и юношеском возрасте,
Своевременное выявление нарушений детородной функции, предрасположенности к различным заболеваниям,
Наблюдение за гормональным фоном в первый триместр беременности (предотвращение возможного выкидыша),
Контроль наступления первого после родов менструального цикла, в котором возможна беременность,
Своевременное выявление гормональных нарушений при использовании внутриматочной спирали,
Контроль восстановления детородной функции после прекращения приема противозачаточных гормональных препаратов,
Самоконтроль гормонального статуса при гормонозаместительной терапии в постклимактерическом периоде.
По данным американских ученых – медиков, в течение женского цикла есть день, когда опасно вступать в контакт с целью зачатия ребенка. По той причине, что существует вероятность рождения неполноценного потомства с генетическими нарушениями. Яйцеклетка живет недолго, но даже за это короткое время она успевает постареть и нельзя допустить, чтобы сперматозоид встретился с такой яйцеклеткой. Что же это за день? Увядание яйцеклетки соответствует периоду спада кристаллизации. Вступление в контакт в этот период с целью зачатия грозит неприятностями для развития будущего ребенка. А определить роковой момент поможет все тот же Микроскоп Арбор.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ о практической ценности микроскопа миниатюрного Арбор.
1. Международный Научно-Медицинский Центр “Здоровье семьи”
Генеральный директор Международного центра здоровья семьи доктор медицинских наук, профессор В.Н.Запорожан
Зав. поликлиникой, кандидат медицинских наук В. В. Беспоясная
2. Консультативный центр по эндокринной патологии беременных и гинекологических больных
Зав. кафедрой профессор, доктор медицинских наук В. В. Щербакова
3. Украинский Институт Усовершенствования Врачей Кафедра Акушерства и Гинекологии №1
Заведующий АН Украины, член-корреспондент АМН России, лауреат премии им. Сингерела, доктор медицинских наук, почетный член национальных научных обществ акушеров-гинекологов НР Болгария, Венгерской НР, СР Румынии, СФР Югославии, член ассоциации акушеров-гинекологов Европы, профессор Л.В.Тимошенко
ЗАКЛЮЧЕНИЕ: Микроскоп Арбор, созданный фирмой "Киев-Донбас" при участии сотрудников кафедры акушерства и гинекологии №2 КИУВ, является удобным устройством индивидуального пользования для объективизации состояния собственного здоровья женщины. Наряду с этим, мини-микроскоп может быть использован каждым врачом акушером-гинекологом и гинекологом-эндокринологом любого уровня / участковым врачом, врачом ЦРБ, клиники / для осуществления скрининг-диагностики нарушений и коррекции функции яичников у женщин различных возрастных групп. При помощи мини-микроскопа Арбор можно определять фертильные и нефертильные периоды менструального цикла, что является необходимым для осуществления естественной контрацепции, выбрать наиболее благоприятное время для зачатия. Его можно использовать как дополнительный метод исследования при ряде гинекологических заболеваний. Проведенный чешскими исследователями в 1993 году анализ эффективности тест-микроскопа Арбор показал, что по основным характеристикам (коэффициент увеличения, способность динамического слежения за изменением кристаллизационной структуры) тест-микроскоп «Арбор» не имеет аналогов среди данного класса оптических индивидуальных средств самоконтроля гормонального статуса женщин.
Только у прибора «Микроскоп Арбор» корпус изготовлен из металла (долговечность), аналоги изготовлены из пластика.
Дизайн у микроскопа «Арбор» разработан итальянцами, прибор имеет размер тюбика туши для ресниц, помещен в пластиковый футляр с крышкой, футляр снабжен кассетницей для хранения серии мазков. Микроскоп Арбор комплектуется набором предметных стекол (32 шт.) для серии мазков. У аналогов всего несколько стекол.
Линза у «Арбор-Элит» изготовлена из стекла, это обеспечивает долговечность прибора и высокое качество изображения. У аналогов линза пластиковая- изображение менее четкое, линза недолговечна.
-«Арбор-Элит» обеспечивает 100-кратное увеличение (микроскопическая картина гораздо больших размеров, чем у аналогов), аналоги только 20-40- кратное.
Половая зрелость собаки.
Половая зрелость суки.
Как и у кобеля, половая зрелость суки зависит от возраста и размера породы (от 6 до 18 месяцев). Первые течки, в основном, проходят дискретно и могут быть не замечены. Следует, однако, различать у сук половую (способность к овуляции) и физиологическую (способность выдерживать все сроки беременности и родить щенков) зрелость, получение потомства от них в эти первые течки нежелательно, т. к. родовые пути к данному моменту не достигают своего развития.
С наступлением половой зрелости функциональная деятельность генитального аппарата у самки приспосабливается к ритму цикла, который, в основном проявляется 2 течками в год.
Течка у сук.
Течение цикла.
Во время проэструса растущие фолликулы яичников под влиянием гипофиза вырабатывают гормоны, называемые эстрогенами, которые отвечают за изменение поведения (привлечение кобелей, потребность ласки, вылизывание петли) и физического состояния самки. Слизистая оболочка петли наполнена кровью, из ее просвета выделяется кровянистая жидкость, позволяющая кобелю находить суку по следу, хотя она его еще не подпускает.
Период принятия кобеля обычно соответствует фазе эструса. Часто это сопровождается рефлекторной реакцией, для которой характерна поза, проявляющаяся отведением хвоста в сторону, вызываемым стимуляцией петли. Однако к этому признаку следует относиться с осторожностью, поскольку некоторые суки допускают кобеля и вне периода овуляции. Во время эструса истечения из петли становятся светлыми и превращаются в слизь, что облегчает вязку.
В стадии овуляции яйцеклетки выходят недозревшими, но готовыми к оплодотворению, как правило, 48 часов спустя.
В отличие от большинства других видов животных яичники сук начинают вырабатывать прогестерон в течение нескольких дней до овуляции. Его концентрация в крови постепенно нарастает независимо от того, оплодотворена самка или нет. Поэтому концентрация прогестерона в крови позволяет определить у собак время овуляции, но не беременности.
Затем концентрация прогестерона в крови стабилизируется и остается постоянной на протяжении всего постэстрального периода благодаря секреции желтых тел, образовавшихся в яичниках после выхода из них овоцитов. Этот гормон подготавливает матку к имплантации эмбриона и обеспечивает ее развитие, т. е. подготовку к обычной беременности. Его секреция резко падает через 2 месяца с момента овуляции, обеспечивая тем самым условие лактации и инволюцию (обратное развитие) матки, вплоть до фазы полового покоя (анэструса).
Вязка или искусственное осеменение.
Техника мазка слизистой влагалища.
После осмотра разбухшей петли и оттягивания ее складки вниз шпатель вводят верти- кально вдоль задней стенки влагалища так, чтобы он не попал в ямку клитора. Когда шпатель достигает верхнего свода влагалища, ему следует придать горизонтальное положение и продвигать его как можно дальше, не прилагая при этом усилий. Затем с помощью круговых движений собирают выделения секрета и отслоившиеся клетки вокруг шейки матки.
В начале течки шпатель обычно становится красным, а в конце фазы проэструса он может быть розового цвета или бесцветным или с наличием гноя в случае инфекционного воспаления матки или влагалища.
Затем кончик шпателя (с содержащимся на нем материалом) аккуратно прокатывают по предварительно обезжиренному предметному стеклу, во избежание наслоения клеток стараются не попадать дважды на одно и то же место.
Затем нанесенный на предметное стекло цитологический материал фиксируют и отправляют к ветеринарному врачу либо окрашивают для непосредственного исследования.
Анализ мазка.
Помимо уточнения момента овуляции, использование влагалищных мазков может иметь много других показаний.
Если от вас сбежала собака в состоянии течки или вы подозреваете, что имела место нежелательная вязка через решетчатую стенку клетки, то ветеринарный врач может определить возможное наличие сперматозоидов (в течение 6 часов после коитуса). Он может также определить риск оплодотворения в зависимости от стадии полового цикла (например, если сука находится в фазе анэструса, начала проэструса или постэструса, то возможность оплодотворения минимальна, по крайней мере, это менее значимо в сравнении с риском раннего абортирования при назначении лекарственного препарата).
С помощью мазков можно контролировать эффективность определенных методов лечения в фазе анэструса, обычно противопоказанных в период половой активности, например, при проведении какой-либо гормональной терапии.
Наконец, мазки используют для количественного определения гормонов при выявлении некоторых причин бесплодия (скрытая течка или таковая без фазы овуляции, персистенция желтого тела в яичниках, инфекционное воспаление влагалища и т. д.).
Влагалищные мазки показаны к использованию, т. к. сама процедура не вызывает сложности, такие преимущества, как быстрота выполнения и небольшая стоимость, могут оказать неоценимую услугу в воспроизводстве собак. Тем не менее, в некоторых случаях, когда интерпретация мазков вызывает сомнение или полученные результаты цитологического анализа не сопоставимы с клинической картиной, или если поездка для проведения вязки или искусственного осеменения оспаривается, то владелец может дополнить этот анализ другим, более точным - количественным определением прогестерона в крови.
Количественное значение прогестерона в крови (тест на установление выделения яйцеклетки из яичника) определяют в до- и постовуляционный периоды, при этом концентрация прогестерона в плазме крови у суки, как правило, возрастает в течение нескольких дней до 40 нг/мл и более в сравнении с ее базовым значением (менее 2 нг/мл). Варьирование уровня прогестерона в крови как у разных собак, так и у одной и той же особи (от цикла к циклу) происходит относительно быстро. Если мы вспомним, что 80% самок готовы к вязке на 12-й день их течки, то можно прийти к заключению, что овуляция бывает или более ранней, или более поздней (например, доберман, немецкая овчарка).
В настоящее время считают, что овуляция наступает при содержании общего прогестерона в крови, превышающего 15 нг/мл (необходимо учитывать отклонения, связанные с проведением количественного анализа в разных лабораториях). При этом первую вязку или искусственное осеменение следует проводить в течение 48 часов с момента ее возникновения (учитывают время, необходимое для созревания овоцитов), а контрольную - через 2 дня после первой. Такая степень достоверности определения сроков овуляции позволяет увеличить не только процент удачных вязок или искусственного осеменения, но также и плодовитость. Дело в том, что малочисленность помета, которую часто приписывают возрасту самки или недостаточному количеству овоцитов, иногда объясняют неправильным выбором даты вязки.
Следовательно, дополнительные методы исследования, основанные на использовании влагалищных мазков и определении количественного содержания прогестерона в крови с соблюдением всех требований, позволяют обеспечить более точный контроль течки и рентабельности производства (увеличение числа оплодотворений, плодовитости, уменьшение числа бесполезных поездок в случае неудачной вязки).
Диагностика инфертильности (бесплодия) у самки.
Перед тем как лечить суку от бесплодия, необходимо установить причину его возникновения. Например, регулярное проведение анализа крови на содержание прогестерона у самки, страдающей инфертильностью, можно дополнить методами исследования на другие гормоны и результатами клинического обследования, что позволит определить, заключается ли причина в ановуляторном цикле, рассасывании эмбрионов в связи с инволюцией желтого тела, несовершенстве половой зрелости или избытке мужских гормонов вследствие проведенного лечения.
Определение необходимости кесарева сечения.
У большинства пород с короткой мордой (брахицефалов), таких, как бульдоги или мопсы, роды бывают затруднены, поэтому ветеринарный врач зачастую вынужден прибегать к кесареву сечению. Если провести его слишком рано, то щенки, оказавшись недоношенными, как правило, гибнут от недоразвития респираторного аппарата в течение нескольких часов с момента рождения. Если провести его слишком поздно, это приведет к сдавливанию плода в родовых путях (в области таза), что, в свою очередь, вызовет состояние церебральной аноксии (уменьшение кислорода в тканях головного мозга). Дело в том, что у собак выживаемость плода связана с поздним развитием легочного поверхностно-активного вещества (сурфактанта), определяющего при рождении дыхательную способность щенков. Это формирование легких напрямую связано с падением сопутствующего родам уровня прогестерона в крови, происходящего в течение нескольких дней до идеальной даты родов. Таким образом, простой анализ крови на количественное содержание прогестерона в крови точно укажет ветеринарному врачу на возможность выживания щенков после проведения кесарева сечения. Использование такого метода оценки позволило значительно увеличить выживаемость щенков после кесарева сечения, особенно у бульдогов, более 90 % которых появляется на свет именно таким путем.
Количественный анализ на лютеонизирующий гормон (ЛГ).
ЛГ (лютеотропный гормон, способный трансформировать клетки фолликула, обеспечивающие питание овоцита в желтом теле, которое вызывает секрецию прогестерона)- гормон, выделяемый гипофизом, провоцирует овуляцию. Определение пика секреции этого вещества позволяет достаточно рано определить овуляцию, а не его последствия (увеличение содержания прогестерона). За исключением нескольких конкретных случаев диагностики инфертильности, данный метод еще не получил широкого распространения в практической ветеринарии.
Вязка.
Нарушения фертильности (способности к деторождению) у сук.
| Нарушения | Природа | Симптомы | Практические советы |
| Общие нарушения | Гормональные нарушения во время роста | Поздняя первая течка - порой сопровождается аномалией телосложения и половых органов | Исключить из репродукции |
| Лекарства против течки до наступления половой зрелости | Отсутствие течки или она слабо выражена | ||
| Чрезмерное ожирение | Продолжать худеть | ||
| Гормональные нарушения во взрослом состоянии | Облысение без восстановления, пигментация кожи, ожирение, апатия, чрезмерная жажда | Анализы на гормоны (щитовидная железа, надпочечники, яичники), возможно лечение | |
| Аномалии выработки яйцеклеток | Принятие некоторых лекарств (андрогены, прогестогены, кортизон, анаболики) | Слабо выраженные симптомы (иногда гипертрофия клитора при принятии андрогенов) | Правильно определить показания и риск, связанный с гормональным лечением (нарушения часто становяться необратимыми) |
| Старость | Снижение плодовитости | Отправить на заслуженный отдых | |
| Киста, опухоль | Аномальная течка (затянутая, нимфомания) | Эхография яичников | |
| Болезни яичников, гормональная недостаточность | Отсутствие течки, цикл без овуляции или поздняя овуляция | Количественный анализ гормонов, возможна операция Влагалищные мазки, определение концентрации прогестерона Попытаться стимулировать созревание и выход яйцеклеток |
|
| Аномалии во время течки | Повреждения вульвы или влагалища; Боль в гениталиях или суставах; Предрасположенность породы; Агрессивность суки; Индифферентность; Неопытность; Диспропорции кобеля и суки |
Отказ спариваться | Помощь при вязке или искусственное осеменение |
| Аномалии оплодотворения | Плохая синхронизация овуляции и вязки Препятствия к оплодотворению (инфекция) |
Случка без оплодотворения | Тщательное наблюдение за течкой или повторным искусственным осеменением или искусственная индукция овуляции; Убедиться в проницаемости гениталий и отсутствии инфекции |
Овуляция — процесс разрыва фолликула - пузырька, который под воздействием гормонов гипофиза созревает в яичнике собаки во время каждой течки. Определение овуляции часто имеет принципиальное значение, поскольку по статистике 80% собак, оставшихся бесплодными после спаривания, были повязаны не вовремя.
Дополнительные сложности возникают у владельцев собак, имеющих скрытые (малокровные или бескровные течки), значительное количество шерсти и невысокое либидо. В таком случае иногда требуется определять не только время овуляции, но и наличие течки у собаки вообще.
Яйцеклетка, выходящая из фолликула, созревает для оплодотворения 2 дня, поэтому оптимальное время для вязки - через 1-2 дня после разрыва фолликула. В большинстве случаев принято вязать собак на 12-14 день течки, между тем овуляцияу разных собак и даже у одной и той же собаки в разные циклы может происходить от 3го до 23 дня эструса.
Для определения момента овуляции существует довольно много методов разной степени сложности как домашних, так и медицинских. Косвенным признаком овуляции может быть повышение либидо суки, повышение её привлекательности для кобелей, посветление выделений из петли. Многие заводчики пользуются измерением уровня глюкозы в вагинальной слизи, а также специальными приборами для определения электропроводимости оной слизи.
Если же говорить о более научных методах - их три: вагинальная цитология, УЗИ яичников и анализ на прогестерон крови. Все методы имеют свои плюсы и минусы, свои ограничения.
Вагинальная цитология: мазок, который берется стерильным ватным тампоном с дорсальной стенки влагалища. Суть метода состоит в том, что под воздействием гормонов, выделяемых «крышечкой» фолликула (эти гормоны называются эстрогенами) эпителий влагалища превращается из 4х слойного в 40 слойный, соответственно отшелушивается значительно большее количество поверхностных клеток, которые мы и находим в мазке, предварительно окрасив его.
Плюс метода состоит в его доступности и быстроте - анализ занимает от 5 минут, однако всё, что мы можем сказать по этому анализу - что фолликул зреет\созрел. Мы не можем судить о его разрыве и выходе яйцеклетки.
При разрыве фолликула его донышко начинает превращаться в желтое тело беременности. Этот процесс всегда в норме происходит после овуляции вне зависимости от факта спаривания суки. Желтое тело беременности выделяет гормон, поддерживающий беременность - прогестерон. В крови после овуляции мы наблюдаем стремительный скачок уровня этого гормона - за двое суток уровень прогестерона может подняться с 3 до 45 нмоль. Преимущество анализа - высокая точность. Если уровень прогестерона соответствует постовуляционному - значит фолликул точно созрел и точно разорвался. Сложность состоит в том, что брать анализ крови на прогестерон ежедневно мягко говоря не очень удобно.
На УЗИ яичников мы можем видеть фолликулы, приблизительно подсчитать их, наблюдать их разрыв, то есть наблюдать овуляцию «онлайн». Но и у этого метода есть ограничения: яичники чрезмерно «округлой» или очень крупной собаку (например упитанного алабая) рассмотреть непросто, сложность для визуализации могут представлять также газы, часто находящиеся в кишечнике собаки и особенности анатомического строения (у плоских и длинных собак яичники прикрыты последними ребрами).
