Про заболевания ЖКТ


Существуют различные методики подсчёта:

  • В камере Горяева.
  • По Фонио.
  • При помощи люминесцентной микроскопии.
  • С применением электронно-автоматических счётчиков.

Подсчёт обычно производится по методу швейцарского хирурга начала 20 века А.Фонио.

Метод Фонио

Подсчёт тромбоцитов по Фонио ― это самый распространённый метод.

Преимущество которого заключается в том, что тромбоциты учитываются не в жидком объёме, а в окрашенном мазке:

  • клеточные элементы хорошо видны;
  • исследовать материал можно в любое время, а не сразу после получения биологического материала;
  • облегчается их «привязкой» к одной тысяче эритроцитов в 1 мл крови.

Кожу пациента протирают досуха.

Возможны два варианта действий лаборанта:

  1. На место взятия анализа наносится небольшая капля 14% магнезии для предупреждения свёртывания крови. Полученную каплю крови смешивают с раствором и распределяют по предметному стеклу. Мазок сушат и окрашивают.
  2. В пробирку вносят 25 мкл 14% магнезии или 6% ЭДТА и полный стеклянный капилляр крови, полученной из пальца, смешивают инвитро и готовят мазок. Время его высушивания зависит от реактива (2-3 часа при магнезии, 45 минут при ЭДТА). Затем окрашивают.

При исследовании мазка применяют окуляры с полем зрения, разделённым на квадраты, что облегчает подсчёт клеточных элементов.

В каждом квадрате считают эритроциты и тромбоциты. Подсчёт ведётся до обнаружения ровно одной тысячи эритроцитов.

Число тромбоцитов составляет абсолютную величину в промилле по отношению к эритроцитам (‰).

Зная общие цифры эритроцитов в 1 мкл крови, нужно умножить его на результат промилле для определения содержания в 1 мкл крови тромбоцитов:

Т = , где Т ― количество тромбоцитов, Э ― число эритроцитов в 1 мкл.

Исследование по Фонио может иметь погрешности, связанные с плохим качеством мазка и неравномерным распределением по стеклу тромбоцитов.

Подсчёт в камере Горяева является более точным, его погрешность всего 6,5%, но он более трудоёмкий и должен проводиться немедленно после взятия крови.

Для проведения метода кровь разводят реактивом для лизиса эритроцитов в 200 раз, вносят пипеткой в сетки камеры, настраивают фазово-контрастное устройство и под микроскопом считают тромбоциты в 25 больших квадратах.

Для нахождения числа тромбоцитов в 1 мкл крови полученные цифры перемножают на 2000.

Коррекция уровня тромбоцитов

При несоответствии числа тромбоцитов по Фонио норме нужна помощь врача.

Повысить уровень тромбоцитов можно при помощи некоторых кортикостероидов, витаминов, препаратов-коагулянтов Дицинон, Этамзилат, Викасол, Револейт, Содекор.

Для укрепления сосудистой стенки полезна аскорбиновая кислота. В рационе должны быть мясо, морепродукты, гранаты, тыква, шиповник, свёкла, зелень.

Для снижения уровня тромбоцитов назначают препараты магния. В диете должны присутствоватьтакие продукты как лук, чеснок, рыбий жир, оливковое и льняное масло, томатный сок, яблочный уксус, зелёный чай.

Правильный сбалансированный рацион ― залог здорового равновесия свёртывающей системы крови.

Уменьшение или увеличение числа клеток является опасным для организма человека, поэтому огромное значение имеет определение количества тромбоцитов.

Методики определения числа клеток

Применяются разные методики подсчета тромбоцитов. Сейчас подсчитывание в мазке крови ведется несколькими способами:

  • Подсчитывание по методике Фонио;
  • Вычисление количества тромбоцитов камерой с использованием методики Горяева;
  • Подсчитывание с помощью автоматических электронных счетчиков;
  • С использованием люминесцентного микроскопа.

Болезнь, при которой увеличивается количество клеток, называется тромбоцитоз. При снижении – в крови возникает тромбоцитопения.

Норма у здорового человека:

Подсчитывание числа тромбоцитов по Фонио

Исследование по методике Фонио применяется наиболее часто. Оно базируется на определении количества пластинок в окрашенных мазках крови с использованием химреактивов:

  • сульфат магния 14%;
  • этилендиаминтетраацетат (ЭДТА) натрия 6%.

Ход исследования

Сульфат магния или ЭДТА при помощи капилляра Панченкова помещают в стеклянную пробирку, туда же помещают капиллярную кровь, которую берут, используя тот же капилляр.

Кровь с реактивом перемешивают, а затем из полученного раствора готовят материал для определения.

Для этого на предметное стекло наносятся тонкие мазки, они фиксируются и окрашиваются:

  • с применением магния сульфата – 2-3 часа;
  • с использованием ЭДТА –минут.

После высыхания мазки разглядывают под микроскопом, у которого имеется иммерсионный объектив для увеличения изображения и усиления яркости.

Кровяные пластинки должны располагаться по отдельности, чтобы этого добиться используется самое тонкое место мазка.

Как считать тромбоциты в мазке крови?

Для подсчета мазок передвигается под объективом микроскопа, чтобы были подсчитаны 1000 эритроцитов. Затем считают находящиеся среди них кровяные пластинки.

При известном количестве эритроцитов в одном литре крови, можно произвести подсчет абсолютного числа тромбоцитов.

Определение количества при помощи камеры Горяева

По методу Горяева тромбоцитарные пластинки считает камера с применением цитратного вещества. Число клеток определяют в 1 МК/л или в литре крови.

Для этого используют следующие химреактивы:

Химреактив №1:

  • гидрохлорид кокаина 3 г;
  • хлорид натрия 0,25 г;
  • фурацилин 0,25 г;
  • вода 100 мл.

Химреактив №2:

  • 1% раствор оксалата аммония. Раствор надо прокипятить, профильтровать и после этого он хранится на холоде. При помощи этого реактива растворение эритроцитов происходит быстрее.

Ход исследования

Используют материал, взятый из вены в пробирку с цитратом. Этим веществом служит ЭДТА. При взятии из пальца тромбоциты могут давать сгустки.

Нужно взять 4 мл химреактива №1 или №2, добавить 0,02 мл крови, получится разведение в 200 раз. Кровь с реактивом слегка взбалтывают, оставляют на полчаса, за это время происходит лизис.

В подготовленную камеру помещают материал из подготовленной крови, а затем опускают во влажную чашку Петри на 5 минут для оседания тромбоцитарных клеток.

В камере клетки хорошо видны, благодаря тому, что используется фазово-контрастные линзы объектива.

Частицы пыли и грязи должны быть хорошо вымыты, чтобы не оставлять след на стеклянной таре и самой камере, иначе их при подсчете можно принять за тромбоциты.

Подсчитывание с помощью счетчиков

Счетчик называется автоматический гематологический аппарат. С его помощью можно определить количество кровяных пластинок, также сделать гистограмму (распространение по величине).

Аппаратное исследование достаточно точное, делается экспресс-методом, который выдает результаты в течение 1 минуты.

Более дешевые модели счетчиков только определяют число, а усовершенствованные приборы делают качественный обзор целого комплекса клеток, куда входит:

При помощи аппаратного гематологического счетчика можно также построить график расположения клеток по размеру.

Методика люминесцентной микроскопии с помощи лампы считается устаревшим. Для определения тромбоцитов получил меньшее распространение и сейчас почти не используется.

Для обзора и подсчитывания клеток крови используют различные методы микроскопического исследования, а также гематологические электронные счетчики.

Внедрение новых технологий для изучения состава клеток позволит исключить ошибки лаборантов и добиться более высокой точности и качества диагностики.

© Лечение тромбов, тромбозов. Копирование материалов разрешается только при оставлении активной ссылки на источник.

Подсчет тромбоцитов

Принцип. Подсчет количества тромбоцитов на 1000 эритроцитов в окрашенных мазках крови и перерасчет их числа на 1 мкл или 1 л, в соответствии с количеством эритроцитов в этом объеме крови.

Реактивы: 1) 14% раствор сульфата магния; 2) 2,6% раствор этилендиаминтетраацетата натрия (ЭДТА).

Ход определения. В пробирку вносят реактив 1 или 2, взятый капилляром Панченкова до отметки «75», затем добавляют кровь, взятую тем же капилляром до отметки «К (0)». Содержимое пробирки перемешивают и готовят тонкие мазки. Фиксируют и окрашивают по Романовскому-Гимзе (см. «Окраска мазков крови») в течение 2–3 ч (при использовании реактива 1) или 35–45 мин (при использовании реактива 2).

Высохшие мазки микроскопируют с иммерсионным объективом, подсчитывая тромбоциты в тонких местах препарата (эритроциты должны располагаться изолированно друг от друга). Тромбоциты окрашиваются в розовато-фиолетовый цвет, имеют округлую форму, размер 2–4 мкм, в центре клетки отчетливо определяется зернистость - грануломер, периферическая часть имеет более светлую окраску, незернистая - гиаломер.

Подсчет производят следующим образом. В каждом поле зрения микроскопа считают число эритроцитов и тромбоцитов, передвигая мазок до тех пор, пока не будут просчитаны 1000 эритроцитов. Для удобства и большей точности счета рекомендуется пользоваться окуляром с уменьшенным полем зрения. При его отсутствии можно уменьшить поле зрения приемом, описанным в «Подсчет ретикулоцитов». Параллельно берут кровь для подсчета числа эритроцитов в камере Горяева.

Расчет. Зная количество эритроцитов в 1 мкл (или 1 л) крови и количество тромбоцитов на 1000 эритроцитов, легко рассчитать и содержание тромбоцитов в крови:

где X - количество тромбоцитов в 1 мкл (1 л) крови; а - количество тромбоцитов, подсчитанных в мазке крови на 1000 эритроцитов; b - количество эритроцитов в 1 мкл (1 л) крови; 1000 - количество эритроцитов, подсчитанных в мазке крови.

Подсчет тромбоцитов по фонио

Исследование тромбоцитов по Фонио

Тромбоциты – уникальные безъядерные клетки, которые не только принимают активное участие в регенерации клеточных структур, а также препятствуют развитию обильного кровотечения, но и регулируют процессы проницаемости клеточных мембран. Их количество в крови может свидетельствовать о состоянии здоровья, а отклонения от нормы – первая причина развития патологических процессов сердечно-сосудистой системы. Данные клетки синтезируются из плазмы мегакариоцитов – крупных клеток костного мозга. Продолжительность жизни не велика – всего 5-7 дней, после чего они утилизируются селезенкой и частично печенью. Тромбоцитам свойственно старение, от которого зависит качественный состав крови. Чтобы определить уровень содержания тромбоцитов в крови, используют лабораторный анализ Фонио, при котором исчисление производится наиболее точно. Особенности этого метода и способы вычислений разберем далее.

Исследование по Фонио

Такой способ лабораторного исследования предполагает забор крови из пальца, после чего ее смешивают с реактивами и рассматривают мазок под микроскопом. Определение числа тромбоцитов исчисляется по формуле, в эквиваленте отношения к эритроцитам, как наиболее тяжелым и объемным кровяным клеткам. То есть, каждый мазок рассматривают в перерасчете на 1000 эритроцитов. Такое соотношение позволяет более точно выявить наличие патологий синтеза тромбоцитарных клеток, а также снижает риски выявления псевдобтромбоцитоза.

Если рассматривать это соотношение более подробно, то вначале исчисляется общее количество эритроцитов в мазке, после чего показатель умножается на мл или мкл крови. Полученную величину сопоставляют с количественным составом тромбоцитов.

Суть метода основывается на взаимозависимости фракций крови. Иными словами, при повышенном содержании тромбоцитов, эритроцитов также будет больше. Прямая пропорциональность позволяет определять не только тромбоцитарный уровень в мазке крови, но и пересчитывать его на литры и микролитры.

Это удобно, поскольку нет необходимости брать много крови и обследовать ее всю, на что уйдет масса времени, сил лаборанта, а также реактивов, от чего стоимость анализа будет значительно выше, нежели имеется сейчас.

Последовательность проведения анализа

Для анализа тромбоцитарного уровня по Фонио обычно имеются показания, поэтому пациента заблаговременно подготавливают к забору крови. Предлагается отказаться от лекарственных препаратов, алкоголя, жирной и сладкой пищи, а также газированных напитков за 24 часа до проведения исследования.

Для анализа потребуются следующие реактивы:

  • раствор сульфата магния – выступает в качестве коагулянта;
  • краситель Романовского-Гимзы – возволяет разглядеть тромбоциты в общей массе крови, цвет которых измениться под воздействием красителя.

Кровь на анализ берут из безымянного пальца, который хорошо дезинфицируют спиртом или муравьиной кислотой.

После этого производится прокол скарификатором пучки. Первую появившуюся кровь снимают сухой ватой, поскольку она не пригодна для анализа. В появившуюся на поверхности пальца вторую каплю, вводят специальный раствор сульфата магния, после чего производят забор образованной субстанции специальным стеклянным периходником в пробирку. Палец пациента обрабатывается спиртом, дабы избежать инфицирования.

Из полученных образцов готовят мазки, нанося небольшое количество крови на предметное стекло, а также внося краситель, который поможет при подсчете фракций. Продолжительность окраски составляет от 35 минут до 2 часов, в зависимости от качества реактивов.

Ход определения

Итак, по истечении определенного времени (2-3 часа), предметные стекла помещают под микроскоп, где производиться подсчет тромбоцитов и эритроцитов.

Зрительно определить тромбоциты несложно. В зависимости от возраста, клетки могут окраситься в фиолетовый или розовый оттенок. Их границы четки, а в центре отмечается наличие специфических гранул. Форма округлая вытянутая, иногда с наличием ровных овалов.

На определенном фиксированном участке считают количество эритроцитов, а также, сколько на них приходиться тромбоцитов. Такая процедура производится до тех пор, пока не будет подсчитано ровно 1000 эритроцитов. Во внимание берут только близлежащие клетки, которые образуют группы. Единичные включения не несут никакой ценности и не составят биологической нагрузки при исследовании.

Предметное стекло перемещают под микроскопом до тех пор, пока не получиться нужная отметка. Для этого меняются поля зрения, что доступно современной технике. В некоторых клиниках данный подсчет производиться автоматически. Специальные микроскопы способны самостоятельно распознавать различные фракции крови, а также определять их соотношение в общей массе.

Получив необходимые показатели, уровень тромбоцитов рассчитывают по формуле:

  • х – искомый уровень тромбоцитов;
  • а – количество тромбоцитов в мазке на 1000 эритроцитов;
  • b – количество эритроцитов в 1 л крови;
  • 1000 – показатель содержания эритроцитов в мазке.

Расчет количества тромбоцитов

Чтобы было понятнее, как производиться расчет, разберем на примере. В ходе лабораторного исчисления было установлено, что количество тромбоцитов (указывается в промилле, поскольку величина относительная количеству эритроцитов) 75. На 1 мкл количество эритроцитов составляет 5х10, из чего следует, что количество тромбоцитов: 753,5х10/1000. В итоге получается, что в 1 мкл крови содержится 262х10, что считается нормой.

Особенности и преимущества метода исследования

Лабораторное определение и подсчет тромбоцитов по Фонио имеет несколько преимуществ:

  1. Точность анализа – достигается за счет использования формулы расчета, компоненты которых легко можно подсчитать в капле крови.
  2. Быстрота проведения – от момента забора крови до получения результата может понадобиться не более 2 часов, а с использованием высокоточного оборудования процедура займет всегоминут.
  3. Не требуется дорогостоящих реактивов – достаточно ввести коагулянт, чтобы спровоцировать активность тромбоцитов, а также подкрасить мазок крови специальным раствором, который улучшит процесс распознания безъядерных клеток.

Главная особенность исследования заключается в получении наиболее точных результатов, нежели при развернутом анализе крови (коагулограмма).

Что влияет на качество анализа?

Выделяют 3 основополагающих фактора, которые могут значительным образом повлиять на качество и результат анализа определения количества тромбоцитов по Фонио:

  1. Подготовка пациента к анализу – забор крови не производят в состоянии алкогольного опьянения (уровень тромбоцитов наряду с лейкоцитами увеличении в 3-4 раза), а также при сильной физической усталости и наличии продолжительного стресса со всеми вытекающими. Эти состояния могут провоцировать чрезмерную выработку тромбоцитов, которая является исключительно периодической и не несет в себе информацию о реальном положении вещей. Перед забором крови лучше ничего не есть, а также отказаться от приема любых лекарств. Оптимальное время для взятия образца – 7-9 часов утра.
  2. Качество реактивов – при использовании некачественных реактивов могут присутствовать отклонения от нормы. В подобном случае пациенту предлагают сдавать анализ на Фонио трижды, с периодичностью 2-3 дня. Это позволит наиболее полно и точно оценить состояние здоровья, а также минимизировать погрешность.
  3. Особые состояния организма – при менструации у женщин, беременности, в лактационный период результативность методики стремительно снижается. Дело в том, что гормоны, которые управляют женским организмом, постоянно подстраиваются под биологические процессы, контролируя их функциональность. У мужчин такие состояния могут наблюдать при сильной физической нагрузке, особенно это касается спортсменов и тяжеловесов.

Выявить истинные проблемы со здоровьем поможет только комплексное обследование всего организма, предпосылкой проведения которого является неудовлетворительный результат анализа крови по Фонио.

Таким образом, данный метод исследования уровня тромбоцитов не только удобен и прост в проведении, но и позволяет получать точные результаты.

Исчисления одной капли крови можно сопоставить с литром или микролитром, поэтому сразу будут видны отклонения от нормы, если они есть. Стоимость процедуры невелика, а продолжительность ожидания результатов не превышает 3 часов. Это позволяет быстро получить нужные данные в критических состояниях пациента, когда каждая секунда может стать последней. Простота формулы позволяет самостоятельно исчислять уровень тромбоцитов, но на сегодняшний день большинство клиник пользуются специальными электронными микроскопами, способными производить все подсчеты и самостоятельно выдавать конечный результат.

Подсчет тромбоцитов по Фонио

Тромбоциты по фонио что это

Тромбоциты ― клеточные компоненты крови, выполняющие функцию остановки геморрагии и формирования сгустка при ранении. Своё название они получили от греческих слов thrombos (комок, сгусток) и kytos (клетка).

Вырабатывает их костный мозг. 3-4 раза в месяц происходит полное обновление тромбоцитов. Разрушение старых тромбоцитов производится селезёнкой и печенью.

Нормы концентрации тромбоцитов

Нормальный уровень тромбоцитов в 1 мм3 крови ―тыс.

У разных групп населения эти цифры могут достаточно существенно отличаться:

  1. Для детей, начиная от годовалого возраста, и взрослых нормой считаетсятыс.
  2. У новорождённых нормальные значения расширяются ― от 100 до 420 тысяч в 1 мм3.
  3. Норма для мужчин ―тыс. в 1 мм3 крови, причём максимум (400) достигается к 40 годам, а к старости норма падает до 320 тыс.
  4. У женщин содержание тромбоцитов ―тыс. в 1 мм3; максимум (340) отмечается влет.

При менструациях и в период беременности нормой считается снижение до 150 тыс.:

  1. в менструальный период это объясняется необходимостью снижения свёртываемости для обеспечения полного отторжения эндометрия в матке; у девочек-подростков при месячных уровень тромбоцитов может упасть до 75 тыс.;
  2. при беременности содержание тромбоцитов падает вследствие нарастания объёма крови, но это может быть и признаком алиментарной недостаточности (плохого питания).

О чём говорят отклонения от средних значений

Спад уровня тромбоцитов (тромбопения) возникает:

  • при лучевых поражениях,
  • при интоксикациях (бензолом и свинцом),
  • заболеваниях крови,
  • коллагенозах,
  • хронических нефритах.

Вследствие тромбоцитопении снижается эластичность сосудов, происходят внутренние кровотечения, проявляющиеся гематомами и петехиями (точечными кровоподтёками).

Повышение уровня тромбоцитов обнаруживается как следствие:

  • употребления некоторых лекарственных препаратов;
  • хирургических операций;
  • удаления селезёнки;
  • травм, сопровождающихся значительным кровотечением;
  • злокачественных опухолей;
  • железодефицитной анемии.

При увеличении количества тромбоцитов есть риск развития тромбозов ― внутрисосудистого образования сгустков, ведущего к прекращению кровотока.

Важно: Опасной ситуацией при беременности является тромбофилия ― повышение уровня тромбоцитов свыше 380 тыс./мл.

Это имеет тяжёлые последствия в виде:

У детей различают тромбоцитоз первичный и вторичный. Первичное превышение выявляется при врождённых патологиях крови, реже ― при приобретённых.

Вторичный тромбоз развивается при инфекционных заболеваниях:

Ему сопутствует и повышенное число лейкоцитов.

Тромбоциты по Фонио

Коагулограмма ― это число тромбоцитов в объёме крови.

Уровень концентрации тромбоцитов в кровяном русле возрастает после еды и физической нагрузки, поэтому от приёма пищи до сдачи крови должно пройти 8 часов.

Забор материала в утренние часы предполагает и исключение физической нагрузки.

Для большей достоверности результатов надо произвести троекратную сдачу анализа с разницей в 3-5 дней.

Эти правила соблюдают лаборатории ЦИР, где всегда можно сдать анализы крови.

Существуют различные методики подсчёта:

  • В камере Горяева.
  • По Фонио.
  • При помощи люминесцентной микроскопии.
  • С применением электронно-автоматических счётчиков.

Подсчёт обычно производится по методу швейцарского хирурга начала 20 века А.Фонио.

Метод Фонио

Подсчёт тромбоцитов по Фонио ― это самый распространённый метод.

Преимущество которого заключается в том, что тромбоциты учитываются не в жидком объёме, а в окрашенном мазке:

  • клеточные элементы хорошо видны;
  • исследовать материал можно в любое время, а не сразу после получения биологического материала;
  • подсчёт тромбоцитов облегчается их «привязкой» к одной тысяче эритроцитов в 1 мл крови.

Кожу пациента протирают досуха.

Возможны два варианта действий лаборанта:

  1. На место взятия анализа наносится небольшая капля 14% магнезии для предупреждения свёртывания крови. Полученную каплю крови смешивают с раствором и распределяют по предметному стеклу. Мазок сушат и окрашивают.
  2. В пробирку вносят 25 мкл 14% магнезии или 6% ЭДТА и полный стеклянный капилляр крови, полученной из пальца, смешивают инвитро и готовят мазок. Время его высушивания зависит от реактива (2-3 часа при магнезии, 45 минут при ЭДТА). Затем окрашивают.

При исследовании мазка применяют окуляры с полем зрения, разделённым на квадраты, что облегчает подсчёт клеточных элементов.

В каждом квадрате считают эритроциты и тромбоциты. Подсчёт ведётся до обнаружения ровно одной тысячи эритроцитов.

Число тромбоцитов составляет абсолютную величину в промилле по отношению к эритроцитам (‰).

Зная общие цифры эритроцитов в 1 мкл крови, нужно умножить его на результат промилле для определения содержания в 1 мкл крови тромбоцитов:

Т = , где Т ― количество тромбоцитов, Э ― число эритроцитов в 1 мкл.

Исследование по Фонио может иметь погрешности, связанные с плохим качеством мазка и неравномерным распределением по стеклу тромбоцитов.

Подсчёт в камере Горяева является более точным, его погрешность всего 6,5%, но он более трудоёмкий и должен проводиться немедленно после взятия крови.

Для проведения метода кровь разводят реактивом для лизиса эритроцитов в 200 раз, вносят пипеткой в сетки камеры, настраивают фазово-контрастное устройство и под микроскопом считают тромбоциты в 25 больших квадратах.

Для нахождения числа тромбоцитов в 1 мкл крови полученные цифры перемножают на 2000.

Коррекция уровня тромбоцитов

При несоответствии числа тромбоцитов по Фонио норме нужна помощь врача.

Повысить уровень тромбоцитов можно при помощи некоторых кортикостероидов, витаминов, препаратов-коагулянтов Дицинон, Этамзилат, Викасол, Револейт, Содекор.

Для укрепления сосудистой стенки полезна аскорбиновая кислота. В рационе должны быть мясо, морепродукты, гранаты, тыква, шиповник, свёкла, зелень.

Для снижения уровня тромбоцитов назначают препараты магния. В диете должны присутствоватьтакие продукты как лук, чеснок, рыбий жир, оливковое и льняное масло, томатный сок, яблочный уксус, зелёный чай.

Правильный сбалансированный рацион ― залог здорового равновесия свёртывающей системы крови.

Тромбоциты по Фонио: норма, подсчет, что это такое?

Один из самых распространенных методов лабораторного исследования состава крови – тромбоциты по Фонио.

Этот метод получил популярность благодаря тому, что полученный биоматериал можно исследовать не сразу, а в течение нескольких часов после забора, что для многих лабораторий является немаловажным фактором.

Анализ может дать небольшую погрешность, поэтому при необходимости его можно повторить через 3 – 5 дней.

Но к такому решению прибегают редко: как правило, если требуется высокая точность результатов, используются более дорогие и точные методы исследований.

Что такое тромбоциты?

Кровь любого человека состоит из плазмы (жидкой среды), в которой в свободном состоянии находятся несколько типов кровяных клеток: лейкоциты, тромбоциты и эритроциты.

Каждый тип кровяных клеток выполняет свою определенную функцию в организме, поэтому коагулограмму крови (лабораторное исследование на состав) часто используют для диагностики различных заболеваний и оценки общего здоровья организма.

Тромбоциты – это маленькие безъядерные клетки. Их часто называют красными кровяными тельцами из-за характерной окраски. Основная функция тромбоцитов – останавливать кровоток в месте нарушения целостности сосуда.

Именно тромбоциты закрывают место кровотечения, образовывая своего рода пробку. После перекрытия места повреждения тромбоциты ускоряют процесс свертывания плазмы и способствуют заживлению поврежденного участка.

Тромбоциты способны выделять специальные ферменты, которые способствуют ускорению процесса деления клеток, поэтому считаются незаменимым внутренним механизмом по стимуляции регенерации поврежденных тканей. Тромбоциты отвечают за регулировку проницаемости и эластичности сосудов.

Красные кровяные клетки живут совсем недолго, от 5 до 8 дней. В зависимости от стадии развития выделяют юные тромбоциты, зрелые и старые.

В небольших количествах в крови могут присутствовать так называемые «формы раздражения» и «дегенеративные формы», которые выделяются при появлении патологических процессов в организме. У здорового человека до 95 % красных кровяных клеток находятся в стадии зрелости.

Как проходит анализ?

Для измерения количества тромбоцитов используется артериальная кровь (из пальца). Забор материала обычно проходит с утра, поскольку для получения достоверных результатов важно, чтоб пациент не ел в течение 8 – 10 часов и избегал физических нагрузок.

Первую каплю крови, появляющуюся сразу после прокола, обычно не используют для проведения анализа.

Лаборант должен протереть палец сухой стерильной марлей или ватой, а к забору биоматериала приступить только со второй появившейся капли крови.

Для проведения исследования кровь необходимо смешать с 14 % раствором магнезии, чтобы предотвратить свертывание. Лаборант может нанести раствор непосредственно на палец или в пробирку.

Для более быстрого получения результатов в пробирке кровь могут смешать с раствором ЭДТА. Далее к полученному биоматериалу добавляют специальные реагенты и наносят на предметное стекло.

После того как мазок высохнет, его начинают окрашивать, чтобы фракции кровяных клеток можно было рассмотреть под микроскопом. Окраска может занять от получаса до нескольких часов в зависимости от качества реагентов.

Подсчет проводят визуально, с использованием специальных сегментированных окуляров. На такие окуляры нанесена специальная расчетная сетка, которая облегчает подсчет.

Окрашенный тромбоцит приобретает розоватый или фиолетовый оттенок, в зависимости от возраста клетки. Именно поэтому тромбоциты принято называть красными кровяными тельцами.

Подсчет тромбоцитов по методу Фонио производят относительно количества эритроцитов. Предметное стекло с мазком постепенно передвигают под микроскопом и считают количество эритроцитов.

Как только счет достигает 1000, переходят к подсчету тромбоцитов на этом же участке. При исследовании учитываются только скопления клеток.

Кровяные тельца, находящиеся в относительном удалении от группы клеток аналогичного типа, считаются исключением и медицинского значения не имеют.

В некоторых лабораториях исследование проходит почти полностью автоматически. Современные микроскопы способны распознавать различные типы кровяных клеток и производить расчет без помощи человека. Такие микроскопы подсчитывают общее количество различных кровяных клеток и их соотношение.

Количество тромбоцитов подсчитывают относительно к эритроцитам, поскольку это самые крупные кровяные клетки.

Кроме того, количество тромбоцитов на микролитр крови имеет прямую зависимость с количеством эритроцитов: если вследствие какой-либо патологии увеличивается содержание эритроцитов, общее число тромбоцитов будет превышать допустимую норму.

Подсчет тромбоцитов по Фонио имеет свои преимущества. При таком исследовании результаты могут быть готовы очень быстро, от 20 минут.

Для проведения анализа не требуется дорогостоящих реагентов, только антикоагулянт и красители. С другой стороны, составление коагулограммы (более полного описания состава крови) более целесообразно, если необходимо получить общее представление о здоровье пациента.

При коагулограмме можно исследовать различные показатели, используя достаточно малое количество биологического материала, пациенту не придется сдавать кровь несколько раз.

Что влияет на достоверность результатов?

Достоверность полученных результатов зависит как от самого пациента, так и от лаборатории. Важно, чтобы при проведении исследования использовались только качественные реагенты.

Просроченные или дешевые химические составы могут значительно исказить результаты анализа. В лучшем случае врач сможет определить, что результаты неверны, и назначить повторную сдачу анализа.

В худшем – врачу будет сложно установить правильный диагноз, особенно если показатели крови расходятся с общей клинической картиной.

Помимо качества химических составов, на достоверность результатов влияет и соблюдение технологического процесса проведения исследования.

Соблюдение стерильности, правильная маркировка пробирок, точное соблюдение сроков окрашивания и подсушки, качество оборудования – все это может оказать значительное влияние на достоверность полученных результатов.

Со стороны пациента ответственность за качество исследования заключается в соблюдении правил подготовки к анализу.

Кровь необходимо сдавать строго натощак, по истечении как минимум 8 часов с последнего приема пищи.

Перед забором крови нельзя заниматься спортом: утреннюю пробежку и тренировку в спортзале необходимо перенести.

За 24 часа до проведения анализа пациент должен отказаться от алкогольных напитков, поскольку спирт увеличивает количество лейкоцитов и тромбоцитов в несколько раз.

За 2-3 дня до анализа стоит избегать стресса, повышенных физических нагрузок и психоэмоциональных перегрузов: все эти факторы способны временно изменить состав крови, нарушив соотношение различных типов кровяных тел.

Если вы находитесь на медикаментозном лечении, то необходимо согласовать с врачом прием медикаментов накануне сдачи анализа.

Некоторые лекарственные препараты могут внести временные изменения в состав крови. Врач либо порекомендует отказаться от медикаментов за 8 – 20 часов до сдачи анализа, либо будет принимать во внимание текущее лечение при расшифровке результатов исследования.

Расшифровка результатов

В справке о результатах анализа обычно указывается количество тромбоцитов по Фонио и норма, с которой пациент может сравнить свои показания.

Допустимое содержание тромбоцитов в одном кубическом миллиметре крови различается для мужчин и женщин, и довольно сильно зависит от возраста.

Для младенцев до года пределы нормы достаточно широки: от 100 до 400 тысяч на миллиметр кубический крови. После года норма для ребенка становится аналогичной норме для взрослых: от 180 до 350 тысяч.

Для мужчин до 40 – 45 лет нормальным считается содержание от 180 до 400 тысяч. Чем старше мужчина, тем большее количество тромбоцитов в крови допустимо.

Но в преклонном возрасте уровень тромбоцитов должен несколько сократиться, до максимально допустимого значения в 320 тысяч.

У женщин колебания уровня тромбоцитов в крови связано с возрастом. Максимум в 350 тысяч отмечается в период активного полового созревания, около 15 лет.

Несмотря на то, что и в дальнейшем такой уровень тромбоцитов все еще входит в понятие нормы, в большинстве случаев уровень этих кровяных тел несколько падает.

При менструации количество тромбоцитов сокращается вдвое. Это вызвано природным механизмом: для полноценного отторжения эпителия в матке (менструальные выделения) необходима пониженная свертываемость крови.

Сдавать анализ во время месячных женщинам не рекомендуется, оптимальными считаются первые несколько дней после окончания активных менструальных выделений.

Тромбоциты по фонио: что это, подсчет и норма по методу фонио

Тромбоциты по Фонио – эффективный метод исследования, который помогает установить любые отклонения от нормы. Проводится расчет по специальной схеме, в том числе и процедура.

Тромбоциты – кровяные тельца, которые принимают участие в свертывании крови. Чтобы подсчитать точное количество этих элементов необходимо воспользоваться одним из современных исследований, например, методом Фонио. Тромбоциты по Фонио подсчитываются с повышенной точностью, поэтому исследование является самым комфортным непосредственно при использовании автоматического подсчета.

Приготовление средства и расчет

Для определения тромбоцитов по методу Фонио необходимо использовать такие реактивы, как:

  1. Сульфат магния раствор 14% (для приготовления средства рекомендуется использовать исключительно стерильный раствор).
  2. Краситель Романовского-Гимзы.
  3. Фиксаторы Лейшмана или Май-Грюнвальда.

Необходимо понимать, что даже незначительные отклонения от требований могут привести к приготовлению некачественного средства.

Перед тем как нанести препарат на кожные покровы, рекомендуется их предварительно обработать. Они должны быть сухими. Прокол делается небольшим. Затем на него необходимо нанести небольшую каплю раствора сульфата магния и осторожно смешать. Из того соединения, которое образовалось, делаются мазки для исследования. Их нужно высушить и окрасить по методу Паппенгейма.

Расчет производится на одну тысячу данных кровяных телец и тромбоцитов, которые попали в исследуемый высушенный мазок. Для получения абсолютного значения тромбоцитов рекомендуется воспользоваться установленной и везде принятой формулой расчета.

В данной ситуации всеми необходимыми подсчетами должен заниматься исключительно специалист.

Нормы концентрации

Установленный уровень тромбоцитов в 1 куб. мм крови составляет от 120 до 400 тысяч.

Необходимо учитывать тот факт, что подсчет тромбоцитов по Фонио проводится с учетом возрастной категории пациента и это немаловажно:

  • Для детей в возрасте от года и пациентов старшей возрастной группы норма составляет от 180 до 320 тысяч.
  • Для новорожденных малышей норма – от 100 до 420 тысяч.
  • Норма для мужской части населения – от 180 до 400 тысяч. В данной ситуации стоит учитывать, что максимальная отметка может отмечаться у пациентов в возрасте от 42 лет, не ранее. Для пожилых норма должна не превышать отметки 320 тысяч.
  • У женской половины населения норма тромбоцитов должна быть в пределах от 180 до 34 тысяч. Максимальное значение отмечается у девочек в возрасте 16 лет, то есть в период полового созревания.

Если у пациентки месячные или она беременная, то нижние отметки нормы уменьшаются до 150 тысяч. Что касается уровня кровяных телец при менструации у девочек в подростковом периоде, то она снижается до отметки 75 тысяч. В период вынашивания ребенка показатели также уменьшаются, и это можно объяснить тем, что происходит увеличение объема крови, но также данное состояние отмечается и при неправильном питании. В такой ситуации проводится дополнительное обследование, корректируется питание.

Все пределы значений учитываются на 1 куб. мм.

Тромбоциты, норма которых свидетельствует о том, что в организме пациента отсутствуют какие-либо отклонения. Необходимо понимать - нарушения также будут сопровождаться не только уменьшением или увеличением показателей в исследованиях крови, но и соответствующей симптоматикой.

Поэтому при первых признаках заболевания стоит сразу обратиться к специалисту и пройти полное, качественное обследование. На основании полученных результатов обязательно назначается терапия.

Уменьшение уровня тромбоцитов может наблюдаться у пациента в такой ситуации, как:

  1. Лучевое поражение.
  2. Отравление организма вредными веществами и соединениями.
  3. Заболевания крови.
  4. Коллагеноз.
  5. Нефрит хронического типа.

Из-за низкого уровня тромбоцитов в крови у больного наблюдается плохая эластичность кровеносных сосудов, внутреннее кровотечение, возникают незначительные гематомы и точечные кровоподтеки.

Повышение уровня данных кровяных телец может наблюдаться у пациента в такой ситуации, как:

  1. Длительный прием некоторых групп медикаментов.
  2. Хирургическое вмешательство.
  3. Удаление селезенки.
  4. Травмирование, которое сопровождается значительным кровотечением.
  5. Злокачественные новообразования.
  6. Анемия железодефицитная.

У пациента, который страдает от повышенного уровня тромбоцитов, возникает риск развития тромбоза. Также опасность возникает и в период вынашивания плода.

У пациентки могут возникнуть такие неприятные последствия, как:

  • токсикоз;
  • прерывание беременности;
  • задержка в развитии плода;
  • варикоз;
  • тромбоз ног;
  • тромбоэмболия;
  • инфаркт, который выступает последствием образования тромбов в сосудах.

У детей диагностируется два вида повышенного количества тромбоцитов:

  1. Первичный тип можно определить только в том случае, если у ребенка присутствуют какие-либо врожденные патологии крови.
  2. Вторичный тип развивается у маленьких пациентов из-за заболеваний, которые носят инфекционный характер. Также параллельно будет отмечаться повышение уровня и лейкоцитов.

В любой ситуации определить отклонения при подсчете поможет именно метод Фонио.

Норма у здорового человека:


Подсчитывание числа тромбоцитов по Фонио

Исследование по методике Фонио применяется наиболее часто. Оно базируется на определении количества пластинок в окрашенных мазках крови с использованием химреактивов:

  • сульфат магния 14%;
  • этилендиаминтетраацетат (ЭДТА) натрия 6%.

Подсчет тромбоцитов в мазке крови

Ход исследования

Сульфат магния или ЭДТА при помощи капилляра Панченкова помещают в стеклянную пробирку, туда же помещают капиллярную кровь, которую берут, используя тот же капилляр.

Кровь с реактивом перемешивают, а затем из полученного раствора готовят материал для определения.

Для этого на предметное стекло наносятся тонкие мазки, они фиксируются и окрашиваются:

  • с применением магния сульфата – 2-3 часа;
  • с использованием ЭДТА – 30-45 минут.

После высыхания мазки разглядывают под микроскопом, у которого имеется иммерсионный объектив для увеличения изображения и усиления яркости.

Кровяные пластинки должны располагаться по отдельности, чтобы этого добиться используется самое тонкое место мазка.

Как считать тромбоциты в мазке крови?

Для подсчета мазок передвигается под объективом микроскопа, чтобы были подсчитаны 1000 эритроцитов. Затем считают находящиеся среди них кровяные пластинки.

При известном количестве эритроцитов в одном литре крови, можно произвести подсчет абсолютного числа тромбоцитов.

Определение количества при помощи камеры Горяева

По методу Горяева тромбоцитарные пластинки считает камера с применением цитратного вещества. Число клеток определяют в 1 МК/л или в литре крови.

Для этого используют следующие химреактивы:

Химреактив №1:

  • гидрохлорид кокаина 3 г;
  • хлорид натрия 0,25 г;
  • фурацилин 0,25 г;
  • вода 100 мл.

Химреактив №2:

  • 1% раствор оксалата аммония. Раствор надо прокипятить, профильтровать и после этого он хранится на холоде. При помощи этого реактива растворение эритроцитов происходит быстрее.

Ход исследования

Используют материал, взятый из вены в пробирку с цитратом. Этим веществом служит ЭДТА. При взятии из пальца тромбоциты могут давать сгустки.

Нужно взять 4 мл химреактива №1 или №2, добавить 0,02 мл крови, получится разведение в 200 раз. Кровь с реактивом слегка взбалтывают, оставляют на полчаса, за это время происходит лизис.

В подготовленную камеру помещают материал из подготовленной крови, а затем опускают во влажную чашку Петри на 5 минут для оседания тромбоцитарных клеток.

В камере клетки хорошо видны, благодаря тому, что используется фазово-контрастные линзы объектива.

Частицы пыли и грязи должны быть хорошо вымыты, чтобы не оставлять след на стеклянной таре и самой камере, иначе их при подсчете можно принять за тромбоциты.

Подсчитывание с помощью счетчиков

Счетчик называется автоматический гематологический аппарат. С его помощью можно определить количество кровяных пластинок, также сделать гистограмму (распространение по величине).

Аппаратное исследование достаточно точное, делается экспресс-методом, который выдает результаты в течение 1 минуты.

Определение числа тромбоцитов - важнейший метод исследования, способный обнаружить наиболее частое нарушение гемостатического потенциала крови - тромбоцитопению. В настоящее время для определения числа тромбоцитов имеется несколько лабораторных технологий (автоматизированный, по Фонио и др.). Наибольшую точность имеет микроскопический метод при подсчете в камере, однако этот метод требует от врача-лаборанта опыта, напряжения зрения, концентрации внимания.

Принцип метода

Принцип метода основан на определении числа тромбоцитов путем их подсчета в камере Горяева обычной световой микроскопией или с помощью микроскопа с фазово-контрастной приставкой после разведения крови и гемолиза эритроцитов раствором оксалата аммония.

С целью повысить точность микроскопического метода число тромбоцитов подсчитывают в двух камерах, затем вычисляют среднюю арифметическую.

Реактивы и оборудование

  • 1% раствор оксалата аммония.
  • Смеситель Сали.
  • Камера Горяева (2 шт.).
  • Световой микроскоп с увеличением х 40 или микроскоп с фазово-контрастной приставкой (например, КФ-4 или др.).

Образцы крови для исследования

Определение числа тромбоцитов возможно в крови, стабилизированной цитратом натрия или нанесенным на стенки пластиковой пробирки мелкодисперсным порошком этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА). При использовании микроскопического метода предпочтительнее брать кровь на цитрате натрия, чтобы исключить влияние ЭДТА на результаты подсчета тромбоцитов.

Техника выполнения

В сухую пластиковую пробирку вносят 1,98 мл 1% оксалата аммония и 0,02 мл крови. Медленно и аккуратно перемешивают смесь в течение 2 мин, а затем ее инкубируют в течение 20 мин при комнатной температуре. Далее заполняют две камеры Горяева содержимым пробирки и на 10 мин помещают их в чашку Петри, в которой находится влажная марля или смоченный фильтр. После этой инкубации, которая необходима для оседания тромбоцитов, подсчитывают их число в 25 квадратах. Среднюю арифметическую результатов подсчета в двух камерах умножают на 1000. При исследовании цитратной крови результат увеличивают на 10 % и умножают на 1000, что позволяет корректировать разведение венозной крови раствором натрия цитрата.

Оценка результатов исследования

У здорового человека число тромбоцитов в периферической крови колеблется в довольно широком диапазоне - от 150 до 400 х 109/л.

Недопустимо исследование числа тромбоцитов в охлажденных образцах крови. При гемолизе возможно занижение числа тромбоцитов. В ряде случаев при исследовании числа тромбоцитов на гематологических анализаторах встречается так называемая псевдотромбоцитопения, обусловленная агрегацией и группировкой тромбоцитов в присутствии ЭДТА. Эту проблему решает забор крови на цитрате натрия.

Для обеспечения контроля качества при подсчете числа тромбоцитов на гематологических анализаторах существуют контрольные образцы с разным содержанием этих клеток. О возможности использования этих образцов для обеспечения контроля качества при подсчете числа тромбоцитов микроскопическим методом не существует общепринятых рекомендаций. Для повышения точности результатов микроскопического исследования следует периодически контролировать воспроизводимость результатов определения числа тромбоцитов разными лаборантами в течение рабочего дня и на основе полученных данных повышать точность и снижать вариацию при выполнении этой методики Коэффициент вариации микроскопического метода у опытных лаборантов не превышает 10 %.

Интерпретация результатов исследования

В клинической картине тяжелого течения идиопатической тромбоцитопенической пурпуры доминирует геморрагический синдром. При вторичных тромбоцитопениях геморрагический синдром, как правило, умеренный, и сочетается с клиническими симптомами основного заболевания, обусловившими тромбоцитопению. В тех случаях, когда число тромбоцитов менее 100 х 109/л длительно наблюдается без каких-либо проявлений фонового заболевания, следует думать об идиопатической тромбоцитопенической пурпуре.

Тромбоцитозы также наблюдаются при миелопролиферативных заболеваниях. Нередко на фоне миелопролиферации отмечают нарушения реологических свойств крови за счет полиглобулии. В последнем случае, а также при числе тромбоцитов более 700 х 109/л у пациентов повышается риск тромбозов. Однако на фоне миелопролиферативных заболеваний, сопровождающихся тромбоцитозом более 1500 х 109/л, парадоксально наблюдается геморрагический синдром.

При тромбоцитопении и наличии геморрагического анамнеза с раннего детского возраста весьма важно оценить размер тромбоцитов, в т. ч. MPV (средний объем) в мазке крови, а также наличие каких-либо включений в тромбоциты.

Причины ошибок

  • Использование одной камеры, меньшее число подсчитываемых квадратов.
  • Неточность градуировки разных смесителей.
  • Ошибки преаналитического этапа исследования, в т. ч. неправильная дозировка цитрата при заборе венозной крови.
  • Недостаточная квалификация лаборанта.

Другие аналитические технологии

Практически все гематологические анализаторы неплохо измеряют число эритроцитов и лейкоцитов в крови, хорошие результаты точности и воспроизводимости демонстрирует метод определения концентрации гемоглобина, реализованный в таких приборах. Однако и в настоящее время еще встречаются образцы анализаторов, которые число тромбоцитов при тромбоцитопениях подсчитывают неточно, и, как правило, наблюдается завышение числа тромбоцитов при их автоматизированном подсчете. Особенно ярко этот недостаток проявляется при работе с образцами крови, в которых число тромбоцитов ниже 50 х 109/л. Этот недостаток есть следствие того, что тромбоциты гораздо мельче других клеток крови, поэтому сложнее выполнить их корректный подсчет в той же камере и такими же техническими приемами, что и другие клетки крови. Следует отметить также, что на показатели точности подсчета тромбоцитов на гематологическом анализаторе весьма существенное влияние оказывают качество и надежность используемых калибраторов. Именно поэтому в сложных диагностических ситуациях или при глубокой тромбоцитопении в анамнезе для уточнения числа тромбоцитов следует применять микроскопический метод.

Подсчет клеток крови в окрашенных мазках имеет низкую точность и воспроизводимость, поэтому он не может быть рекомендован для применения в современных клиниках.

Тромбоциты участвуют во всем процессе свертывания крови, начиная от образования первичного тромба в области повреждения кровеносных сосудов и заканчивая участием в процессах регулирования проницаемости и тонуса сосудов.

Подсчет максимально точного количества тромбоцитов осуществляется при помощи камеры Горяева и метода Фонио. Подсчет тромбоцитов по Фонио довольно точен. Метод Фонио является наиболее удобным именно при автоматическом подсчете.

Необходимые реактивы

Для определения точного количества тромбоцитов по данному методу потребуются такие реактивы как:

  • раствор сульфата магния 14% (обязательно стерильный);
  • краситель Романовского – Гимзы;
  • фиксаторы Лейшмана либо Май-Грюнвальд.

Как готовится препарат

Кожа пальца вытирается максимально на сухо и аккуратно прокалывается.

Затем на кожу наносят маленькую капельку раствора сульфата магния и после смешивают его с выделившейся каплей крови. Из получившейся смеси готовят мазки, которые высушивают и открашивают по Паппенгейму.

Как считаются тромбоциты

В мазке, подвергнутом окрашиванию, считают 1000 эритроцитов и все попавшиеся тромбоциты. В итоге получается число, выражаемое промилле. Чтобы получить абсолютное количество тромбоцитов нужно данную величину перемножить на количество эритроцитов, имеющихся в 1 мкл, а затем разделить на 1000.

К примеру, если в мазках обнаружено 64 промилле тромбоцитов, эритроциты считаются 5 x 10 в 1 мкл, а тромбоциты 64 x 3,5 x 10 разделить на 1000 равно 224 x 10 в 3 степени в 1 мкл.



Если заметили ошибку, выделите фрагмент текста и нажмите Ctrl+Enter
ПОДЕЛИТЬСЯ: